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九月精彩,最新ELISA技術(shù)參數(shù)分析出

閱讀次數(shù):1316   發(fā)布時(shí)間:2014/9/3 8:59:13

     翻開前面的新聞動(dòng)態(tài),在本網(wǎng)站商鋪建立至今共有248條信息,記錄著相關(guān)上海恒遠(yuǎn)生物的點(diǎn)點(diǎn)滴滴。每當(dāng)我司技術(shù)人員總結(jié)出相關(guān)elisa試劑盒及其他產(chǎn)品的新信息都會(huì)時(shí)間發(fā)布出來分享給大家,開學(xué)季已經(jīng)到來,慢慢的有不少實(shí)驗(yàn)室在為本學(xué)期的ELISA實(shí)驗(yàn)而做準(zhǔn)備,上海恒遠(yuǎn)也有新的資訊內(nèi)容要分享給大家!下面一起來看看九月精彩:*新ELISA技術(shù)參數(shù)分析出。

    將樣加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會(huì)與HEV的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEVIgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長(zhǎng):450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEVIgM抗體ELISA試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn),O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。
    tunnel試劑盒與ELISA試劑盒的區(qū)別:tunnel試劑盒即為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法。
    原理:細(xì)胞凋亡中,染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3’末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3’末端,從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè)。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3’末端形成,很少能夠被染色。TUNEL實(shí)際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合的研究方法,對(duì)完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養(yǎng)的細(xì)胞和從組織中分離的細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)測(cè)定,并可檢測(cè)出極少量的凋亡細(xì)胞,因而在細(xì)胞凋亡的研究中被廣泛采用。
    近二十幾年來,免疫學(xué)分析方法發(fā)展突飛猛進(jìn),尤其是在使用標(biāo)記了的抗原和抗體的分析技術(shù)以后,使原來許多經(jīng)典的分析方法在敏感性和特異性方面都不能相比。繼50年代的免疫熒光和60年代的放射免疫分析技術(shù)之后,在70年代初期又建立了用酶來標(biāo)記抗原或抗體的分析技術(shù)。由于酶的高效生物催化作用,一個(gè)酶分子在數(shù)分鐘內(nèi)可以催化幾十幾百個(gè)底物分子發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生了放大作用,使得原來極其微乎其微的抗原或抗體在數(shù)分鐘后就可被識(shí)別出來,這種技術(shù)被稱為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法,本法自70年代初期由VAN WEEMEN、SCHUARS.ENGVALL及PERLMARN等相繼分別報(bào)道后,現(xiàn)已引起廣泛重視。
      
    ELISA試劑盒方法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。本法不僅可以用來測(cè)定抗體,而且也可用于測(cè)定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,可概括四個(gè)方面:
1.免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。 
2.研究抗酶抗體的合成。 
3.顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。 
4.定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份。 
    酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法以其靈敏度高(可達(dá)ng甚至pg水平),特異性好等優(yōu)點(diǎn),在生命科學(xué)各領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,它已邁出醫(yī)藥、臨床領(lǐng)域,步入農(nóng)業(yè)、漁業(yè)、畜牧業(yè)和食品加工業(yè)。
  
    ELISA試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒是用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)。ELISA試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測(cè)技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。
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