有很多客戶向我們咨詢ELISA實(shí)驗(yàn)后如何進(jìn)行曲線制作？對(duì)于那么多的曲線計(jì)算公式，我們?cè)撊绾芜x擇合適的擬合方程呢？恒遠(yuǎn)生物小編給大家總結(jié)：ELISA曲線擬合的那些事。
我們一般可以用軟件繪制也可以通過(guò)excel進(jìn)行制作。按照科學(xué)分析方法，如果存在奇異點(diǎn)或者污點(diǎn)，直接采用線性分析不是很好，要對(duì)擬合曲線的幾個(gè)點(diǎn)進(jìn)行取舍，同時(shí)也可以改用雙對(duì)數(shù)直線擬合或者四參數(shù)曲線擬合。
那么常用的曲線擬合回歸方程主要為以下幾種：
直線回歸：直線回歸是簡(jiǎn)單的回歸模型,也是基本的曲線擬合回歸分析方法，將所有的測(cè)試點(diǎn)擬合為一條直線，其擬合函數(shù)方程式為：y=a+bx。但是因?yàn)閷?shí)際實(shí)驗(yàn)中線性好的情況下可能直線回歸可以獲得較為理想的R2值。那么如果直線線性不理想的情況下如何擬合？作為擁有十多年ELISA產(chǎn)品生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)的企業(yè)，我們會(huì)推薦用戶進(jìn)行多項(xiàng)式擬合來(lái)改善直線回歸線性不理想的問(wèn)題。
第二種二次多項(xiàng)式擬合回歸方程：二次多項(xiàng)式成拋物線狀，開(kāi)口向下或者向上，在很多ELISA實(shí)驗(yàn)中，擬合近似于二次多項(xiàng)式的升段或者降段，所以使用二次多項(xiàng)式擬合時(shí)，取值的范圍都落在曲線的升段或者降段。其擬合函數(shù)方程式為：y=ax2+bx+c
第三種對(duì)數(shù)擬合回歸方程：我們將標(biāo)準(zhǔn)品的O.D測(cè)值設(shè)為x軸，標(biāo)準(zhǔn)品濃度的對(duì)數(shù)作為y軸，濃度是自變量，O.D.值是因變量進(jìn)行曲線擬合。
第四種是四參數(shù)擬合回歸方程：競(jìng)爭(zhēng)法和夾心法都可以用到。它的形狀,根據(jù)情況,可能是一個(gè)單調(diào)上升的類似指數(shù),對(duì)數(shù),或雙曲線的曲線,也可能是一個(gè)單調(diào)下降的上述曲線,還可以是一條S形曲線。它要求X值不能小于0(因?yàn)橹笖?shù)是實(shí)數(shù),故有此要求)。在很多情況下它都可以擬合ELISA的反應(yīng)曲線,所以它也成了ELISA中應(yīng)用廣的模型。
曲線擬合方法雖多，要根據(jù)不同類型ELISA本身的特點(diǎn)，選擇適合的曲線擬合模型，才能得到合理的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。一般情況下，需要綜合考慮標(biāo)準(zhǔn)曲線的趨勢(shì)走向以及R值的大小以及樣本落值情況。
利用Excel四步輕松搞定 ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作！
一步：在Excel表格中輸入濃度和OD值
第 二 步：粘貼”數(shù)字部分貼入ELISA Calc
第 三 步：選擇回歸/擬合模型
第 四 步：由 Y 計(jì)算 Ｘ
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