免疫組織化學(xué)應(yīng)用原則

應(yīng)用的基本原則
　　免疫組織化學(xué)染色在生物醫(yī)學(xué)研究中具有十分廣泛的作用。并且涉及許多研究領(lǐng)域。但是，免疫組織化學(xué)技術(shù)也有其局限性，例如，組織細(xì)胞內(nèi)的待測(cè)物質(zhì)要有抗原性，而且需要有一定濃度方可檢出；檢出的免疫反應(yīng)陽(yáng)性蛋白不能被確定是細(xì)胞新合成的蛋白還是通過(guò)細(xì)胞間運(yùn)輸而來(lái)的蛋白，因此，在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中應(yīng)充分考慮這些特點(diǎn)。如果實(shí)驗(yàn)需要證明已知蛋白為何種細(xì)胞合成，需采用分子原位雜交技術(shù)解決。為引導(dǎo)初學(xué)者在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中合理巧妙地運(yùn)用免疫組織化學(xué)技術(shù)，將其應(yīng)用的基本原則簡(jiǎn)述如下： 　　1．確定細(xì)胞類型和形態(tài)組織細(xì)胞內(nèi)有些蛋白具有組織特異性，如膠質(zhì)原纖維酸性蛋白（gial fibrillary acidic protein，GFAP）只存在于星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)．神經(jīng)絲蛋白（Neurofilament，NF）只存在于神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)。通常把這些具有組織特異性的蛋白稱為標(biāo)記性蛋白（Proteiniliaker）。通過(guò)標(biāo)記性蛋白的特異性抗體可確定細(xì)胞種類。有些細(xì)胞（如表皮內(nèi)朗格漢斯細(xì)胞和黑色素細(xì)胞等）在光鏡下不易辨認(rèn)，通過(guò)對(duì)胞質(zhì)內(nèi)的特定蛋白實(shí)施免疫組化染色，便能清楚顯示此類細(xì)胞外形輪廓。這種作用在神經(jīng)科學(xué)研究和腫瘤臨床病理中顯得尤為重要。 　　2．辨認(rèn)細(xì)胞產(chǎn)物的來(lái)源利用某些細(xì)胞產(chǎn)物為抗原，制備相應(yīng)的抗體，對(duì)組織細(xì)胞實(shí)施免疫組織化學(xué)染色，以確定細(xì)胞產(chǎn)物的來(lái)源。如內(nèi)分泌細(xì)胞產(chǎn)生的各種激素，大多數(shù)可用免疫組化染色技術(shù)辨認(rèn)，據(jù)此可研究細(xì)胞的分泌功能及對(duì)內(nèi)分泌腫瘤作功能分類，檢測(cè)分泌異位激素的腫瘤等，了解細(xì)胞分化程度。  免疫組織化學(xué)染色法（DAB顯色）

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